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兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo),本生,您信任的合作伙伴!本生試劑盒
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒
中文名稱:兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒
英文名稱:rabbitneurotrophin3,NT-3ELISAKit
貨號(hào):BS-4164
規(guī)格:48T/96T
品牌:BUNSEN
儲(chǔ)存溫度::-20℃(較長時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))
有效期:6個(gè)月
ELISA各種樣本收集、處理、保存方法
1.血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置1-2h或4℃過夜,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2.血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20min左右,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3.尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
4.唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
5.細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
(2)細(xì)胞裂解液
收集細(xì)胞培養(yǎng)液,4℃、3000rpm/min離心20min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min,除去細(xì)胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
6.植物標(biāo)本收集、處理、保存方法:
取適量大小組織塊(一般0.2-0.5g),用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M,PH7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準(zhǔn)確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05mol/LTris-HCl,pH7.4PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機(jī)器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000rpm/min離心20min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
7.糞便標(biāo)本收集、處理、保存方法:
采集時(shí)用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
8.組織標(biāo)本收集、處理、保存方法:
將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M,PH7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱重,記錄后剪碎(碎塊盡量小)。將組織按一定的比例(通常組織重量:PBS體積=1:9)加入預(yù)冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿,勻漿時(shí)置于冰上。吸取勻漿液到離心管中,4℃、10000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒
1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
試劑盒靈敏度、精密度、穩(wěn)定性
1.靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的量的能力;2)為試劑對(duì)大量樣品中陽性檢出的能力。2.特異性:常用交叉反應(yīng)率表示。其越高說明特異性越好。
3.精密度:ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時(shí)考察線性范圍
4.穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲(chǔ)存的時(shí)間,一般采用破壞性試驗(yàn)即將試劑存放于37℃保存,定期測(cè)定其靈敏度,特異性和精密度等指標(biāo),直到其質(zhì)量指標(biāo)開始下降為止,通常認(rèn)為37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10℃保存一個(gè)半月。
5.簡便性:指在不影響試劑的前三項(xiàng)指標(biāo)的前題下,實(shí)驗(yàn)和測(cè)定步驟越少越好,在定性試驗(yàn)中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗(yàn)結(jié)果計(jì)算也應(yīng)簡單。
6.安全性:指試劑對(duì)操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
7.經(jīng)濟(jì)性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進(jìn)步降低成本而市場(chǎng)價(jià)格比較合理。
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